تجمع نانوذرات طلا مبتنی بر آزمایش رنگ سنجی برای شناسایی بتای کازئین در نمونه های شیر گاو
چکیده
روش سنتی Kjeldahl، که برای ارزیابی کیفیت شیر گاو مورد استفاده قرار گرفته بود، نقص ذاتی در ارائهء نمونهء وقت گیر و دو تجزیه و تحلیل برای تعیین تفاوت بین محتوای نیتروژن غیر پروتئینی و محتوای نیتروژن کلیِ پروتئین را ایجاد کرده بود. در اینجا، بر اساس پادتنِ عاملدار نانوذرات طلا (AuNPs)، روش رنگ سنجی را برای شناسایی بتای کازئین (β-CN) در نمونه های شیر گاو توصیف نمودیم. محدودهء خطیِ دینامیکی و LOD به ترتیب 0.08–250 lg mL-1 , and 0.03 lg mL-1 r است. علاوه بر این، محتوای واقعی از β-CN در شیر گاو با استفاده از آزمایشات طراحی شده برآورد گشت. نتایج به دست آمده به دقت با آنهایی که از روش Kjeldahl استفاده نمودند، همخوانی داشت. مزایای استفاده از β-CN منجر به این می گردد که AuNP بر اساس تجمع مبتنی بر آزمایش رنگ سنجی، بسیار ساده در نظر گرفته شده است. همچنین حساسیت و ویژگی بالای آن بدون نیاز به آماده سازی نمونه ارائه می گردد که آن را برای شناسایی محل β-CN در نمونه های شیر گاو پیشنهاد می گرداند.
1. مقدمه
چهار کازئین عمده (CNS) در شیر گاو وجود دارد، یعنی as1-، as2-، بتا، و J-CN. بتای-CN از 37 درصد از محتوای کازئین تشکیل شده و ثابت است (جانسون و همکاران، 2009). بنابراین، مقدار B-CN می تواند به عنوان شاخصی برای ارزیابی کیفیت شیر گاو استفاده شود. روش Kjeldahl روشی به رسمیت شناخته شده و استاندارد برای ارزیابی کیفیت شیر گاو است. با این حال، در آن دو مشکل اصلی وجود دارد: آزمایش نسبتا طولانی مدت و ضرورت به انجام دو تجزیه و تحلیل برای شناسایی تفاوت بین نیتروژن غیر پروتئینی و محتوای نیتروژن کل پروتئین. دیگر روش های گزارش بصورت زیر است، مانند آزمایش مبتنی بر حسگر نوری، یونیزاسیون electrospray برای شناسایی طیف سنجی، و آزمایش کروماتوگرافی که به روشهای متفاوت یا تخصصی فنی نیازمند است.
abstract
Traditional Kjeldahl method, used for quality evaluation of bovine milk, has intrinsic defects of time-consuming sample preparation and two analyses to determine the difference between non-protein nitrogen content and total protein nitrogen content. Herein, based upon antibody functionalized gold nanoparticles (AuNPs), we described a colorimetric method for b-casein (b-CN) detection in bovine milk samples. The linear dynamic range and the LOD were 0.08–250 lg mL1 , and 0.03 lg mL1 respectively. In addition, the real content of b-CN in bovine milk was measured by using the developed assay. The results are closely correlated with those from Kjeldahl method. The advantages of b-CN triggered AuNP aggregation-based colorimetric assay are simple signal generation, the high sensitivity and specificity as well as no need of complicated sample preparation, which make it for on-site detection of b-CN in bovine milk samples.
1. Introduction
There are four major caseins (CNs) in bovine milk, namely as1-, as2-, b-, and j-CN. b-CN makes up 37% of the casein content and is steady (Johansson et al., 2009). Therefore, the quantity of b-CN could be used as an index to evaluate the quality of bovine milk. Kjeldahl method is the officially recognized standard method for quality evaluation of bovine milk (Kamizake, Gonçalves, Zaia, & Dimas, 2003). However, it has two main problems: the relatively long testing time and the necessity to carry out two analyses to determine the difference between non-protein nitrogen content and total protein nitrogen content. Other reported methods, such as optical immunosensor based assay (Muller-Renaud, Dupont, & Dulieu, 2004), electrospray-ionisation mass spectrometric detection (Gaucheron, Mollé, Léonil, & Maubois, 1995), and chromatography method (Bramanti, Sortino, Onor, Beni, & Raspi, 2003; Bramanti, Sortino, & Raspi, 2002) require complicated handling procedures or technical expertise.
چکیده
1. مقدمه
2. آزمایش
2.1. مواد و شناساگرها
2.2. سنتزی از AuNPs
2.3. آماده سازی McAb-AuNPs و PcAb-AuNPs دوگانه
2.4. تجزیه و تحلیل از محلول استاندارد
2.5. گزینشی از آزمایش رنگ سنجی
2.6. تجزیه و تحلیل از نمونه های واقعی
3. نتایج و بحث
3.1. حساسیت نمونه برای شناسایی با چشم غیر مسلح
3.2. حساسیت آزمایش برای برآورد طیف UV-VIS
3.3. پویایی واکنش نمونه
3.4. ثبات نمونه
3.5. گزینشی از آزمایش
3.6. قابلیت اجرای آزمایش
4. نتیجه گیری
abstract
1. Introduction
2. Experiments
2.1. Materials and reagents
2.2. Synthesis of AuNPs
2.3. Preparation of McAb-AuNPs and PcAb-AuNPs conjugate
2.4. Analysis of standard solution
2.5. Selectivity of the colorimetric assay
2.6. Analysis of real samples
3. Results and discussion
3.1. Sensitivity of the probe for naked-eye detection
3.2. Sensitivity of the assay for UV–vis spectroscopic measurements
3.3. Reaction dynamics of the probes
3.4. Stability of the probes
3.5. Selectivity of the assay
3.6. Applicability of the assay
4. Conclusion
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت ورد (word) با قابلیت ویرایش، بدون آرم سایت ای ترجمه
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت pdf، بدون آرم سایت ای ترجمه