چکیده
حسگرِ رنگ سنجی در این عمل در جهت شناسایی دقیقِ فعالیت آلفای گليكوسيدی و غربالگری آلفای بازدارندهء (AGIS) با استفاده از تغییرِ نانوذراتِ طلا (AuNPs) توسعه یافته است. دریافت استراتژی مبتنی بر واکنش کاتالیزورِ سه گانه ای است که توسط آلفای گليكوسيدی ایجاد شده است. در حضور آلفای گليكوسيدی، تجمع AuNPs بخاطر اکسیداسیون سیستئین به سیستین در سیستم ممنوع گشته است. با این حال، با اضافه نمودن AGIS، سیستئین مجموعه ای از رخداد AuNPs را ایجاد نموده است. بنابراین، روش جدیدی برای شناسایی دقیقِ فعالیت آلفای گليكوسيدی و غربالگری AGIS با برآوردِ جذب UV-VIS و یا از لحاظ تمایز دیداری توسعه داده شده است. ارتباط مناسب خطی در طیف وسیعی از ارائه داده شده است. محدودهء شناسایی در جهت برای آزمایش آلفای گليكوسيدی یافت شده است که در آن یکی از ذرات، میزان کمتری را به نسبت گزارشات دیگر بیان داشته است. مقادیر IC50 از چهار نوع بازدارنده با روشی مطابق با گزارشات دیگر مشاهده شده است. استفاده از AuNPs تغییر نیافته در این عمل از عملکرد تعدیل یافتهء زمان بر و پیچیده جلوگیری بعمل می آورد. همچنین این روش رنگ سنجیِ ساده و کارآمد می تواند در آزمایشات سایر آنزیم ها توسعه یابد.
1. مقدمه
دیابت بطور قابل توجهی به یکی از مهمترین بیماری های مزمن و رنج آور در سراسر جهان تبدیل شده است. دیابت شامل سه نوع اصلی می باشد: نوع 1، نوع 2 و دیابت بارداری. در سطح جهانی، دیابت نوع 2 یکی از رایج ترین نوع دیابت ها در میان این سه دسته است. این تقریبا برای 90٪ از تمام بیماران دیابتی در نظر گرفته شده است. علاوه بر این، دیابت نوع 2 با افزایش خطر ابتلا به بیماریهای قلبی عروقی و عصبی همراه است. بازدارندهء آلفای گلیکوسیدی (AGIS) یکی از هدف های اصلی در درمان اولیه دیابت و پیشگیری از آن می باشد؛ AGIS نقش بسیار مهمی را در کنترل قند خون بیمار پس از صرف غذا و نگه داشتن سطح قند خون در محدوده نسبتا طبیعی ایفا می کند. بنابراین، اهمیت قابل توجهی را در توسعه روش های دقیق برای تعیین فعالیت های گلیکوسیدی و بازدارندهء آن در داروهای خوراکی جدید و موثر در دیابت نوع 2 برقرار می سازد.
ABSTRACTA
colorimetric sensor has been developed in this work to sensitively detect a-glucosidase activity and screen a-glucosidase inhibitors (AGIs) utilizing unmodified gold nanoparticles (AuNPs). The sensing strategy is based on triple-catalytic reaction triggered bya-glucosidase. In the presence of a-glucosidase, aggregation of AuNPs is prohibited due to the oxidation of cysteine to cystine in the system. However, with addition of AGIs, cysteine induced aggregation of AuNPs occurs. Thus, a new method for a-glucosidase activity detection and AGIs screening is developed by measuring the UV–vis absorption or visually distinguishing. A well linear relation is presented in a range of 0.0025–0.05 UmL1 . The detection limit is found to be 0.001 UmL1 for a-glucosidase assay, which is one order of magnitude lower than other reports. The IC50 values of four kinds of inhibitors observed with this method are in accordance with other reports. The using of unmodified AuNPs in this work avoids the complicated and time-consuming modification procedure. This simple and efficient colorimetric method can also be extended to other enzymes assays.
1. Introduction
Diabetes has become one of the most suffering chronic diseases with highly substantial incidence around the world. Diabetes consists of three main types: type I, type II and gestational diabetes. Globally,type II diabetes is the most common type among the three categories. It almost accounts for 90% of all diabetics. Moreover, type II diabetes mellitus is associated with an increased risk of both cardiovascular and neurological diseases in the development of diabetes [1–4]. a-Glucosidase inhibitors (AGIs) are the main targets in the early treatment and prevention of diabetes. AGIs play a very important role in controlling the patients’ postprandial blood glucose levels and keeping glucose levels within a relatively normal range [5,6]. Therefore, it is of great significant to develop sensitive and easily operated methods to determine a-glucosidase activities and screen a-glucosidase inhibitors for finding new and effective oral medicines of type II diabetes.
چکیده
1. مقدمه
2. آزمایشی/ تجربی
2.1. اطلاعات و داده ها
2.2. ابزار
2.3. آماده سازی AuNPs
2.4. آماده سازیِ محلول ذخیره شده
2.5. شناسایی فعالیت آلفای گلیکوسید و آزمایشات بازدارنده AGIS
3.1. I- /H2O2 اکسیداسیون سیستئین را کاتالیز می نماید.
3.2. آلفای گلیکوسیدی باعث اکسیداسیون سیستئین می شود.
3.3. آزمایشِ فعالیت الفای گلیکوسیدی
3.4. غربالگری AGIS
4. نتیجه گیری
ABSTRACT
1. Introduction
2. Experimental
2.1. Materials
2.2. Instruments
2.3. Preparation of AuNPs
2.4. Preparation of stock solutions
2.5. Detection of a-glucosidase activity and inhibition assays of AGIs
3. Results and discussion
3.1. I/H2O2 catalyzed oxidation of cysteine
3.2. a-Glucosidase triggered oxidation of cysteine
3.3. a-Glucosidase activity assay
3.4. AGIs screening
4. Conclusions