بهینه سازی شرایط آماده سازی و خصوصیات ناتوکیناز انکپسوله کننده لیپوزوم فیتوسترول
لیپوزوم های فیتوسترول با استفاده از روش لایه نازک آماده سازی شدند و برای انکپسوله کردن ناتوکیناز (NK) مورد استفاده قرار گرفتند. به منظور دستیابی به یک اثربخشی انکپسولاسیون بالا در لیپوزوم، یک آزمایش متعارف (L9(3)4) برای بهینه سازی شرایط آماده سازی به کار برده شد. نسبت مولی لسیتین به فیتوسترول، فعالیت NK و نسبت جرمی مانیت به لستین فاکتورهای اصلی بودند که کارایی انکپسولاسیون لیپوزوم ها را تحت تاثیر قرار می دهند. بر اساس نتایج تست تک فاکتوری، این 3 فاکتور برای این مطالعه انتخاب شدند. ما شرایط استخراج بهینه را بر طبق زیر تعیین کردیم: یک نسبت مولی لسیتین به فیتوسترول 2:1، فعالیت NK U ml-12500 و نسبت جرمی مانیت به لسیتین 3:1. تحت این شرایط بهینه شده، یک اثر انکپسولاسیون 62.25% به دست آمد، که تقریبا در توافق با نتایج پیش بینی شده بود. به علاوه، پتانسیل زتا، توزیع اندازه و ریزساختار لیپوزوم های آماده سازی شده، اندازه گیری شد و ما فهمیدیم که پتانسیل زتا برابر -51±3 mv بود و میانگین قطر برابر 194.1 نانومتر بود. از روی نتایج میکروسکوپ الکترون پویشی، ما مشاهده کردیم که شکل لیپوزوم های فیتوسترول، گرد و منظم بودند و هیچ تجمعی را مشاهده نکردیم.
1. مقدمه
ناتو یک غذای سنتی با پروتئین بالا می باشد که عموما در آسیا مصرف می شود و با استفاده از باکتری باسیلوس ناتو که یک منبع پروتئین را در طی یک دوره ی زمانی کوتاه تخمیر می کند، تولید می شود. در سال-های اخیر، این فرضیه توسط چندین کارآمایی بالینی با استفاده از حیوانات و انسان ها تایید شده است. ناتوکیناز (NK) یک آنزیم فیبرینولیتیک قدرتمند می باشد که توسط B. natto تولید می شود و توسط سومی و همکارانش (1990)، سومی (1987) و فوجیتا، نومورا و هونگ (1993) جداسازی شده است. NK می تواند مستقیما فیبرین را بشکند و تولید بدنی پلاسمین و سایر عوامل حل کننده ی لخته را افزایش دهد (Tetsumei et al., 2001; Yamashita, Oda, Giddings, & Yamamoto, 2003). اثبات شده است که NK نسبت به PH و دما پایدار است و بنابراین می تواند در دستگاه گوارش در یک شرایط پایدار وجود داشته باشد (Chaize & Fournier, 2004). در برخی مسیرها، NK در واقع به داروهای حل کننده-ی لخته ارجحیت دارد. اگرچه داروهای سنتی باید به صورت درون رگی در طی 12 ساعت بعداز سکته یا حمله قلبی تزریق شوند اما این مکمل غذایی طبیعی به صورت خوراکی، بر یک اساس منظم در یک دوز روزانه داده می شود که به پیش گیری از تشکیل لخته کمک می کند (Sumi, Hamada & Nakanishi, 1990).
Phytosterol liposomes were prepared using the thin film method and used to encapsulate nattokinase (NK). In order to obtain a high encapsulation efficiency within the liposome, an orthogonal experiment (L9 (3)4 ) was applied to optimise the preparation conditions. The molar ratio of lecithin to phytosterols, NK activity and mass ratio of mannite to lecithin were the main factors that influenced the encapsulation efficiency of the liposomes. Based on the results of a single-factor test, these three factors were chosen for this study. We determined the optimum extraction conditions to be as follows: a molar ratio of lecithin to phytosterol of 2 : 1, NK activity of 2500 U mL1 and a mass ratio of mannite to lecithin of 3 : 1. Under these optimised conditions, an encapsulation efficiency of 65.25% was achieved, which agreed closely with the predicted result. Moreover, the zeta potential, size distribution and microstructure of the liposomes prepared were measured, and we found that the zeta potential was 51 3 mV and the mean diameter was 194.1 nm. From the results of the scanning electron microscopy, we observed that the phytosterol liposomes were round and regular in shape and showed no aggregation.
1. Introduction
Natto is a traditional high-protein food commonly consumed in Asia and is produced using the bacterium Bacillus natto to ferment a protein source over a short period of time. In the recent years, this hypothesis has been confirmed by several clinical trials using animals and humans. Nattokinase (NK) is a potent fibrinolytic enzyme produced by B. natto, and has been isolated from natto by Sumi et al. (1990), Sumi (1987) and Fujita, Nomura, and Hong (1993). NK can break down fibrin directly, while enhancing the body’s production of both plasmin and other clot-dissolving agents (Tetsumei et al., 2001; Yamashita, Oda, Giddings, & Yamamoto, 2003). NK has been demonstrated to be stable to pH and temperature, and can therefore exist in the gastrointestinal tract in a stable condition (Chaize & Fournier, 2004). In some ways, NK is actually superior to conventional clot-dissolving drugs. While traditional drugs have to be administered intravenously and within 12 h of a stroke or heart attack, this natural dietary supplement taken orally on a regular basis at a daily dose may help prevent the formation of thrombi (Sumi, Hamada, & Nakanishi, 1990).
1. مقدمه
2. نتایج و بحث
2.1. اثر زمان تبخیر چرخشی، نسبت مولی لسیتین به فیتوسترول ها، فعالیت NK و نسبت جرمی مانیت به لسیتین روی EE لیپوزوم ها
2.2. آزمایش متعامد (ارتوگونال)
2.3. توزیع اندازه و ریزساختار لیپوزوم ها
2.4. پایداری لیپوزوم ها در طی ذخیره سازی
3. آزمایشگاهی
3.1. مواد شیمیایی و دستورالعمل ها
3.2. آماده سازی لیپوزوم
3.3. کارایی انکپسولاسیون
3.4. آنالیز فعالیت NK
3.5. بهینه سازی EE لیپوزوم ها
3.6. آنالیزهای آماری
4. نتیجه گیری
1. Introduction
2. Results and discussion
2.1. The effect of rotary evaporation time, the molar ratio of lecithin to phytosterols, NK activity and the mass ratio of mannite to lecithin on the EE of liposomes
2.2. Orthogonal experiment
2.3. Size distribution and microstructure of liposomes
2.4. Stability of liposomes during storage
3. Experimental
3.1. Chemicals and instruments
3.2. Liposome preparation
3.3. Encapsulation efficiency
3.4. NK activity analysis
3.5. Optimisation of EE of the liposomes
3.6. Statistical analysis
4. Conclusion
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت ورد (word) با قابلیت ویرایش، بدون آرم سایت ای ترجمه
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت pdf، بدون آرم سایت ای ترجمه