کاربرد آنتی ژن B نوترکیب Echinococcus granulosus در کیت های ELISA
چکیده
Echinococcus granulosus عامل بیماری کیستی اکینوکوکوزیس و به عنوان یکی از مشکلات مهم بهداشت عمومی در مناطق مختلف جهان مطرح می‌باشد. در تشخیص اولیه مشکلاتی وجود دارد از جمله واکنش متقاطع در تست‌های سرولوژیک با سرم بیمارانی که دارای آلودگی‌های انگلی دیگر هستند. استفاده از یک منبع آنتی‌ژنی مناسب بسیار مهم بوده و در توسعه‌ی روش‌های تشخیص سرولوژیک مانند ELISA یک نکته‌ی کلیدی می‌باشد. ما AgB نوترکیب Echinococcus granulosus را بیان و تخلیص نموده و به عنوان آنتی‌ژن در ELISA مورد استفاده قرار دادیم. نمونه‌های سرم از 36 بیمار با کیست هیداتید که با عمل جراحی مورد تأیید قرار گرفته‌بود، و همچنین 36 نمونه‌ی سرم از افراد سالم با استفاده از AgB و کیت تجاری Euroimmun با ELISA مورد بررسی و از نظر ویژگی و حساسیت مورد مقایسه قرار گرفت. حساسیت 66/91% و ویژگی 22/97% با کیت دست‌ساز به دست آمد.
مقدمه
Echinococcus granulosus گونه‌ای از کرم‌های پهن هیداتید و عامل بیماری کیستی اکینوکوکوزیس و به عنوان یکی از مشکلات مهم بهداشت عمومی در مناطق مختلف جهان مطرح می‌باشد. تشخیص بالینی بیماری کیستی هیداتید (CHD) با روش‌های تصویربرداری مختلی مانند اولتراسونوگرافی یا رادیولوژی ممکن است. تشخیص اولیه باید با روش‌های آزمون ویژه‌تری تأیید شود؛ مانند آزمون‌های سرولوژیک که بر پایه‌ی ردیابی آنتی‌بادی‌های علیه آنتی‌ژن‌های ارگانیسمی در سرم بیماران استوارند (گریم و همکاران 1998). آزمون‌های سرولوژیک معمولی مانند ایمونوالکتروفورز ، دیفوزیون دوگانه در آگار و هماگلوتیناسیون غیر مستقیم امروزه تقریباً با روش‌های سنجش حساس‌تری مانند ELISA، ایمونوبلات (IB) و آزمون آنتی‌بادی ایمونوفلوئورسنت غیر مستقیم (IFA) جایگزین شده‌اند (ویرجینیو و همکاران 2003). آزمون ELISA یک آزمون با حساسیت بسیار بالا است که قویاً برای ردیابی آنتی‌بادی‌های ویژه در موارد CHD انسانی توصیه می‌شود (پاریا 1998؛ پاول و استفانیاک 2001).
Abstract
Echinococcus granulosus causes human cystic echinococcosis as an important public health problem in many regions of the world. There are some problems in primary diagnosis such as cross-reaction with sera from patients with other parasitic disease in serological tests. The use of an appropriate source of antigenic material is a very important and crucial point in the improvement of the serodiagnostic features such as enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method. We expressed and purified recombinant AgB of Echinococcus granulosus and used as antigen in ELISA method. Serum samples were given from 36 cystic hydatid disease patients that have been confirmed by surgical operation as well as 36 healthy individuals sera were tested by ELISA method using recombinant AgB and compared with commercial kit (Euroimmun) for specificity and sensitivities value. The sensitivity of 91.66% and specificity of 97.22% were determined by homemade kit.
Introduction
Echinococcus granulosus is a species of hydatid tapeworm causing human cystic echinococcosis, which is an important public health problem worldwide. Cystic hydatid disease (CHD) is detectable clinically through various imaging techniques such as ultrasonography or radiology. The primary diagnosis must be confirmed by more specific testing, such as serological tests based on the discovery of antibodies against the organismal antigens in the patient’s serum (Grimm et al. 1998). Ordinary serological tests such as immunoelectrophoresis, double diffusion in agar, or indirect hemagglutination are being replaced by more sensitive assay methods such as enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), immunoblot (IB), and indirect immunofluorescent antibody test (IFA) (Virginio et al. 2003). ELISA is a high-sensitivity test that is strongly recommended for the detection of specific antibodies in human CHD cases (Parija 1998; Paul and Stefaniak 2001).
چکیده
مقدمه
مواد و روش‌ها
تخلیص پروتئین
آنالیز وسترن بلات
ELISA
نتایج
بحث
Abstract
Introduction
Materials and methods
Protein purification
Western blot analysis
ELISA
Results
Discussion
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت ورد (word) با قابلیت ویرایش، بدون آرم سایت ای ترجمه
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت pdf، بدون آرم سایت ای ترجمه