همبستگی انتخاب پذیری لیگاندهای اسید چرب برای PPARα با اتصال به عنصر سیس
چکیده
گفته می شود که گیرنده فعال ساز تکثیر پروکسی زوم (PPARα) یک تنظیم کننده اصلی برای متابولیسم اسید چرب می باشد. اسید های چرب زنجیره بلند موجب تحریک فعالیت ژن های مرتبط با متابولیسم اسید چرب از طریق PPARα می شود. این مسئله مشخص نیست که ایا شدت فعال سازی PPARα در میان اسید های چرب مختلف متفاوت است یا خیر. در این مطالعه، اسیدهای چرب مختلف در توانایی فعال سازی PPARα با تست حساسیت پروتئاز تفاضلی، تست تغییر تحرک الکتروفورتیک و تست گزارشگر کایمر GAL4-PPAR در سلول روده Coco-2 مقایسه شد. DPSA نشان داد که اسید های چرب اشباع 18-20 گروه کربنی با 3 تا 5 پیوند مضاعف منجر به تحریک تغییرات کنفورماسیونی می شود. تغییرات ناشی از لیگاند حساسیت به پروتئاز با بهبود اتصال هترودیمر PPARα–RXRα به عنصر پاسخ PPAR همراه است. تست گزارشکر کایمرای نشان داد که فعالیت مستقل از اتصال DNA با عنصر PPAR ارتباط دارد. تست گزارشگر کایمر GAL4-PPAR نشان داد که فعالیت PPARα ناشی از اسید های چرب مختلف با طیف وسیعی از شدت هاست که با تغییرات کنفورماسیونی PPARα ارتباط دارد. نتایج نشان می دهد که PPARα دارای انتخابیت بیشتری برای انواع خاصی از اسید های چرب اشباع نشده است و این که تغییر کنفورماسیونی ناشی از لیگاند PPARα منجر به افزایش در اتصال DNA به عنصر پاسخ PPAR و فعالیت مستقل از اتصال DNA می شود.
مقدمه
اسید های چرب، به عنوان ترکیبات غذایی اصلی و مهم، همراه با چندین هورمون در تنظیم بیان ژن در پاسخ به تغییرات رژیم غذایی مشارکت می کنند. این تنظیم بیان در چندین مسیر متابولیکی رخ داده و در بر گیرنده مکانیسم هایی است که مصرف سوخت را بر طبق قابلیت دسترسی لیپید و گلوکز کنترل کرده و در عین حال تبادلات، انتقال، ذخیره و استفاده از این عناصر مغذی و متابولیت های آن ها را کنترل می کند. این مکانیسم ها در کنار یکدیگر، هموستازی انرژی را شامل می شوند، با این حال تغییر این تعادل می تواند منجر به حالت های پاتولوژیکی نظیر چاقی، چربی خون، دیابت و بیماری های قلبی عروقی شود( جامپ و کلارک 1997). اخیرا، چندین ازمایشگاه، نشان داده اند کهﮔﻴﺮﻧﺪه. ﻫﺎي ﻓﻌﺎل ﻛﻨﻨﺪه ﺗﻜﺜﻴﺮ. ﭘﺮاﻛﺴﻴﺰوم α (PPARα)، که یک فاکتور رونویسی قابل فعالسازی با لیپید می باشد که متعلق به ابر خانواده گیرنده هورمون هسته می باشد، اکسیداز استیل کوانزیم A را تنظیم افزایشی می کند، که ژن معرفی می باشد که در زمان تحریک مسیر متابولیکی برای تجزیه اسید چرب( اکسیداسیون بتا) فعال سازی می شود( هوستلتر و همکاران 2005، جامپ و کلارک 1999، کوتا و همکاران 2005). PPARα در بافت های مختلف از جمله روده کوچک بیان می شود (براسیانت و همکاران 1996، اشکر و همکاران 2001).
Abstract
It is thought that peroxisome proliferator-activated receptor α (PPARα) is a major regulator for fatty acid metabolism. Long-chain fatty acids have been shown to induce expression of the genes related to fatty acid metabolism through PPARα. However, it is unclear whether the intensity of PPARα activation is different among various fatty acids. In this study, we compared various fatty acids in the capability of PPARα activation by differential protease sensitivity assay (DPSA), electrophoretic mobility shift assay and GAL4-PPAR chimera reporter assay in intestinal cell line, Caco-2. DPSA revealed that polyunsaturated fatty acids of 18 to 20 carbon groups with 3–5 double bonds strongly induced a PPARα conformational change. The ligand-induced changes in the sensitivity to protease corresponded to the enhancement of the binding of PPARα– RXRα heterodimer to the PPAR-response element (PPRE). The GAL4-PPAR chimera reporter assay revealed that the DNA binding-independent transactivity of PPARα was induced by various fatty acids with a wide spectrum of intensity which correlated with the conformational change of PPARα. These results suggest that PPARα has greater selectivity to certain types of polyunsaturated fatty acids, and that the ligand-induced conformational change of PPARα leads to parallel increases in both DNA binding to the PPAR-response element and the DNA bindingindependent transactivity.
Introduction
Fatty acids, as major dietary constituents, participate together with several hormones in the regulation of gene expression in response to dietary manipulations. This regulation operates on several metabolic pathways and involves mechanisms that control fuel utilization according to the availability of lipid and glucose and govern the interconversion, transport, storage, mobilization, and use of these nutrients and their metabolites. Together these mechanisms ensure an energy homeostasis, but alteration of this balance can lead to pathological states such as obesity, hyperlipidemia, diabetes, and the resulting cardiovascular diseases (Jump and Clarke, 1999). Recently, several laboratories have shown that peroxisome proliferator-activated receptor α (PPARα), a lipid-activatable transcription factor that belongs to the nuclear hormone receptor superfamily, upregulates acyl-CoA oxidase, a representative gene activated when the metabolic pathway for fatty acid break down (βoxidation) is stimulated (Hostetler et al., 2005; Jump and Clarke, 1999; Kota et al., 2005). PPARα is expressed in various tissues including the small intestine (Braissant et al., 1996; Escher et al., 2001).
چکیده
مقدمه
مواد و روش ها
مواد
سنجش حساسیت پروتئاز تفاضلی(DPSA)
سنجش تغییر تحرک الکتروفورتیک(EMSA)
سنجش گزارشگر کایمرا GAL4-PPARα
نتایج و بحث
نتیجه گیری
Abstract
Introduction
Materials and methods
Materials
Differential Protease Sensitivity Assay (DPSA)
Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA)
GAL4-PPARα chimera reporter assay
Results and discussion
Conclusion
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت ورد (word) با قابلیت ویرایش، بدون آرم سایت ای ترجمه
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت pdf، بدون آرم سایت ای ترجمه