همبستگی بین متابولیسم سلولی کورستین و متابولیت گلوکورونید آن
چکیده
سابقه: کورستین (Q) یکی از فراوان ترین فلاونوئیدهای موجود در منابع غذایی انسان است و با ظرفیت بالقوه ی بیماری های مرتبط با چاقی در ارتباط است. کورستین-3-0-B-O- گلوکورونید (Q3GA) متابولیت اصلی در گردش خون است، اما افکتورهای نهایی داخل سلولی برای فعالیت آن هنوز مشخص نیست.
فرضیه/هدف: شناسایی و اندازه گیری متابولیت های داخل سلولی در آدیپوسیت های هیپرتروفی شده ی انکوبه شده با Q یا Q3GA و ارتباط دادن آن ها با تولید درون سلولی گونه های رادیکال اکسیژن (ROS).
روش ها: فرکشن های سیتوپلاسمی به دست آمده و متابولیت های کورستین با استفاده از کروماتوگرافی مایع همراه با یک آشکارساز time-of-flight با یونیزاسیون الکترواسپری (HPLC-DAD-ESI-TOF) تعیین شدند. تولید درون سلولی ROS با استفاده از یک پروب فلورسنت حساس به ROS اندازه گیری شد.
نتایج: Q و Q3GA هر دو به وسيله آديپوسيت هاي هيپرتروفي شده جذب شدند و تاحدی به ترتیب به Q3GA و Q متابوليزه شدند، اما جذب Q بيشتر (92/1- 03/0 میکروگرم/میکروگرم پروتئين) و سريع تر از Q3GA (12/0-0015/0 میکروگرم/میکروگرم پروتئين)، که منجر به افزایش غلظت درون سلولی آگلیکون شد. کاهش درون سلولی ROS با وجود فراوان ترین متابولیت یعنی کورستین ارتباط دارد.
نتيجه گيري: Q و Q3GA به خوبی به آديپوسيت هاي هيپرتروفي شده جذب شده و تا حدودي به ترتیب به Q3GA و Q متابوليزه شدند. کاهش درون سلولی ROS در یک مدل آدیپوسیت هیپرتروفی شده ی تیمار شده با Q یا Q3GA با فراوان ترین متابولیت درون سلولی ارتباط دارد. هر دو ترکیب ممکن است بتوانند به سایر اهداف درون سلولی رسیده و به فعالیت زیستی آنها کمک کنند.
مقدمه
پلی فنول های حاصل از گیاه توانایی بهبود وضعیت برخی بیماری ها را با روش چند منظوره دارند (Barrajon-Catalan et al., 2014; Joven et al., 2012; Joven et al., 2014). مشتقات کورستین (3,3'.4'.5,7- پنتاهیدروکسی فلاوون) (Q) فراوان ترین فلاونوئیدها در منابع غذایی انسان هستند که در همه جا در میوه ها و سبزیجات وجود دارد (Ahn et al., 2008)، این ترکیبات می توانند در سطح سلولی سلول های اپیتلیال روده و باکتری ها به آگیلکون تبدیل شوند. Q پس از جذب، متابولیسم های متفاوتی را به دنبال دارد و کورستین-3-0-8-o-گلوکورونید (Q3GA) بیشترین متابولیتی است که در خون در جریان است. استقرار Q3GA در ماکروفاژها، ضایعات آترواسکلروز، مغز و سلول های ایمنی و قطرات چربی کبد با استفاده از آنتی بادی-های خاص گزارش شده است (oven et al., 2012; Kawai et al., 2008).
Abstract
Background Quercetin (Q) is one of the most abundant flavonoids in human dietary sources and has been related to the capacity to ameliorate obesity-related pathologies. Quercetin-3-O-β-d-glucuronide (Q3GA) is supposed to be the main metabolite in blood circulation, but the intracellular final effectors for its activity are still unknown.
Hypothesis/purpose To identify and quantitate the intracellular metabolites in hypertrophied adipocytes incubated with Q or Q3GA and to correlate them with the intracellular generation of oxygen radical species (ROS).
Methods Cytoplasmic fractions were obtained and quercetin metabolites were determined by liquid chromatography coupled to a time-of-flight mass detector with electrospray ionization (HPLC-DAD-ESI-TOF). Intracellular ROS generation was measured by a ROS-sensitive fluorescent probe.
Results Both Q and Q3GA were absorbed by hypertrophied adipocytes and metabolized to some extent to Q3GA and Q, respectively, but Q absorption was more efficient (1.92 ± 0.03 µg/µg protein) and faster than that of Q3GA (0.12 ± 0.0015 µg/µg protein), leading to a higher intracellular concentration of the aglycone. Intracellular decrease of ROS correlated with the presence of the most abundant quercetin metabolite.
Conclusion Q and Q3GA are efficiently absorbed by hypertrophied adipocytes and metabolized to some extent to Q3GA and Q, respectively. The intracellular decrease of ROS in a hypertrophied adipocyte model treated with Q or Q3GA is correlated with the most abundant intracellular metabolite for the first time. Both compounds might be able to reach other intracellular targets, thus contributing to their bioactivity.
Introduction
Plant-derived polyphenols have demonstrated the potential to improve some disease states by a multitargeted mode of action (Barrajon-Catalan et al., 2014; Joven et al., 2012; Joven et al., 2014). Quercetin (3,3 ,4 ,5,7-pentahydroxyflavone) (Q) derivatives are the most abundant flavonoids in human dietary sources; ubiquitously present in fruits and vegetables (Ahn et al., 2008), they are converted into aglycone on the cell surface of intestinal epithelial cells and bacteria. Upon absorption, Q is subjected to different types of metabolism, with quercetin-3-O-β-d-glucuronide (Q3GA) as the major metabolite circulating in the bloodstream. The localization of Q3GA in macrophages, atherosclerotic lesions, brain and immune cells and lipid droplets of the liver by using specific antibodies has been reported (Joven et al., 2012; Kawai et al., 2008).
چکیده
مقدمه
مواد و روش ها
مواد شیمیایی
تجزیه و تحلیل تجمع Q و Q3GA در آدیپوسیت های 3T3-L1 هایپرتروفی شده، پردازش نمونه و اندازه گیری ROS درون سلولی
تجزیه و تحلیل HPLC-DAD-ESI-TOF و تعیین مقدار
نتایج و بحث
نتیجه گیری
Abstract
Graphical abstract
Keywords
Abbreviations
Introduction
Material and methods
Results and discussion
Conclusions
Conflict of interest
Acknowledgments
Appendix. Supplementary materials
Research Data
References
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت ورد (word) با قابلیت ویرایش، بدون آرم سایت ای ترجمه
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت pdf، بدون آرم سایت ای ترجمه