چکیده
هدف: بررسی محتوای کل پلی فنل ها و سه فعالیت تصفیه کنندگی رادیکال های آزاد سه عصاره مختلف از سه نوع کلون 100 چای (سیاه، سبز و سفید) و اثرات ضد تکثیری آن بر سرطان کولورکتال
مواد و روش ها: پنج پلی فنول مهم یعنی (+) - کاتچین، (-) – اپی کاتچین، (-)- اپی گالوکاتچین، (-)- اپی کاتچین گالات و (-)- اپی گالوکاتچین گالات با استفاده از کروماتوگرافی لایه نازک ( TLC) شناسایی شدند. کاتچین ها توسط کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا ( HPLC) اندازه گیری شدند. فعالیت آنتی اکسیدانی با روش تصفیه رادیکال DPPH اندازه گیری شد، در حالی که برای تعیین زنده مانی سلول لاین سلولی کولون HCT-116 پس از 24 و 48 ساعت از روش 3-(4، 5-دی متیل تیازول-2-yl)-2،5-دی فنیل تترازولیوم برومید (MTT) استفاده شد.
نتایج: متانول آبي (70٪) عصاره چاي سفيد، بیشترین مقدار پلی فنول را داشت (54/0± 67/36 میلی گرم GAE/ گرم وزن خشك). فعالیت تصفیه کنندگی رادیکال DPPH چای سفید 42/0 ± 74/71 درصد بوده و فعالیت بالای ضد تکثیری علیه لاین سلولی سرطانی کولورکتال HCT-116 (54/0±06/86 درصد) دارد.
نتيجه گيري: عصاره چاي سفيد فعاليت بالای تصفیه کنندگی رادیکال DPPH و اثرات ضد تکثیری مناسب علیه لاین سلولی سرطاني كولوركتال HCT-116 دارد كه به احتمال زياد به علت كاتچين است.
مقدمه
چای (Camellia sinensis L.) که متعلق به خانواده Theaceae است، بعد از آب دومین نوشیدنی جهان به شمار می رود و غنی از پلی فنل است [1]. چای ایرانی استفاده زیادی در صنایع دارویی، لوازم آرایشی و صنایع غذایی دارد، زیرا محتویات آن ترکیبات پلی فنولی با خلوص بالا و خواص آنتی اکسیدانی بالا دارد و عاری از مواد افزودنی است [2]. به طور کلی، چای را می توان به سه نوع تقسیم کرد: تخمیر نشده (چای سبز و سفید)، نیمه تخمیر شده (چای oolong) و کاملا تخمیر شده (چای سیاه) [3]. چای سفید قبل از اینکه برگ های چای به طور کامل باز شود برداشت می شود، رنگ روشن داشته و از جوانه ها و برگ های نابالغ پوشیده شده با موهای سفید نازک تشکیل شده است و قبل از خشک شدن اکسیداسیون کمی روی آن انجام می شود [4].
Abstract
Purpose: To evaluate the total content of polyphenols and the free radical scavenging activity of three different extracts of three types of tea clone 100 (black, green and white), and their anti-proliferative effects on colorectal cancer.
Methods: Five major polyphenols, viz, (+)-catechin, (-)-epicatechin, (-)-epigallocatechin, (-)-epicatechin gallate and (-)-epigallocatechin gallate, were identified using thin layer chromatography (TLC). Catechins were quantified by high performance liquid chromatography (HPLC). Antioxidant activity was measured by DPPH radical scavenging method, while 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5- diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay was employed for the determination of cell viability of colon cell line HCT-116 after 24 and 48 h.
Results: The aqueous methanol (70 %) extract of white tea yielded the highest amount of polyphenols (36.67 ± 0.54 mg GAE/g dry weight). The DPPH radical scavenging activity of white tea was 71.74 ± 0.42 %, and it produced high anti-proliferation activity against colorectal cancer cell line HCT-116 (86.06 ± 0.54 %).
Conclusion: White tea extract possesses high DPPH radical scavenging activity, and exerts good antiproliferative effects against colorectal cancer cell line HCT-116, most likely due to its catechin content.
INTRODUCTION
Tea (Camellia sinensis L.), which belongs to the Theaceae, family is the second most widely consumed drink in the world after water, and it is rich in polyphenols [1]. Iranian teas are of immense use to the pharmaceutical, cosmetic, and food industries because their contents of high purity polyphenolic compounds, high antioxidant properties and absence of additives [2]. Generally, tea can be classified into three types: unfermented (green and white teas), partially fermented (oolong tea), and completely fermented (black tea) [3]. White tea harvested before the tea plant leaves open fully, is light in colour and made from buds and immature leaves that are covered with fine white hairs, and undergo little or no oxidation before drying [4].
چکیده
مقدمه
آزمایش ها
مواد گیاهی
روش استخراج
استخراج متانول (70٪)
استخراج آبی
استخراج آبی - متانول (70٪)
تعیین محتوای پلی فنل کل
آنالیز TLC
آنالیز HPLC
تعیین فعالیت تصفیه کنندگی رادیکال DPPH
کشت سلولی
شمارش سلول و آزمایش زنده مانی
اثرات ضد تکثیری عصاره چای سفید (WTE) در شرایط آزمایشگاهی
تعيين غلظت نصف بازدارندگی حداكثر (IC50)
آنالیز آماری
نتایج
محتوای فنلی کل
اسید گالیک در عصاره ها
آنالیز HPLC
فعالیت تصفیه کنندگی رادیکال DPPH
اثرات ضد تکثیری عصاره چای سفید بر لاین های سلولی HCT-116 در شرایط آزمایشگاهی
بحث
نتیجه گیری
Abstract
INTRODUCTION
EXPERIMENTAL
Plant material
Extraction method
Methanol (70 %) extraction
Aqueous extraction
Aqueous - methanol (70 %) extraction
Determination of total polyphenolic content
TLC analysis
HPLC analysis
Determination of DPPH radical scavenging activity
Cell culture
Cell count and viability assay
In vitro anti-proliferative effects of white tea extract (WTE)
Determination of half-maximal inhibitory concentration (IC50)
Statistical analysis
RESULTS
Total phenolic content
Gallic acid in extracts
HPLC analysis
DPPH radical scavenging activity
In vitro anti-proliferative effect of white tea extract on HCT-116 cell lines
DISCUSSION
CONCLUSION