تست رنگ سنجی سریع برای بررسی رشد و بقای سلولی
نمک تترازولیوم در تست رنگ سنجی کمّی برای بررسی بقا و تکثیر سلول های پستانداران مورد استفاده قرار می گیرد. این تست سلول های زنده و نه سلول های مرده را شناسایی می کند و سیگنال تولید شده به درجه ی فعال شدن سلول ها بستگی دارد. بنابراین از این روش می توان برای اندازه گیری میزان سمیت سلولی، تکثیر و فعال شدن سلول ها استفاده کرد. نتایج را می توان بر روی یک اسپکتروفتومتر چند منظوره با قابلیت اسکن (الایزا ریدر) قرائت کرد که درجه ی بالایی از دقت را نشان می دهد. در این تست، هیچ مرحله ی شستشویی وجود ندارد. از مزیت های مهم تست رنگ سنجی، سرعت و دقت آن و عدم استفاده از رادیو ایزوتوپ است. ما همچنین از این تست به منظور اندازه گیری لنفوکین های تکثیرشونده، تحریکات میتوژن و لیز سلولی توسط کمپلمان استفاده کرده ایم.
مقدمه
بسیاری از سنجش های بیولوژیکی به اندازه گیری بقا و یا تکثیر سلول های پستانداران نیاز دارند. این اندازه گیری را می توان با روش های مختلفی انجام داد: شمارش سلول هایی که حاوی یا فاقد رنگ هستند، اندازه گیری پروتئین نشاندار شده با 5aCr بعد از لیز سلولی و اندازه گیری میزان الحاق نوکلئوتیدهای نشاندار شده با رادیواکتیو (] [3H تیمیدین یا IZS] [- یودو- دئوکسی یوریدین) در طول تکثیر سلولی. روش رادیواکتیو می-تواند تا حدودی خودکار باشد و می تواند تعداد نسبتا زیادی از نمونه ها را بررسی کند؛ اما حتی با استفاده از این روش ها هم پردازش هزاران نتیجه در هر روز دشوار است. در پژوهش حاضر ما نمونه های زیادی از لنفوکین های مختلف که موجب تکثیر سلول ها می شوند را آزمایش می کنیم؛ بنابراین ما به یک آزمایش سریع و کمّی نیاز داریم که بتواند تعداد زیادی از نمونه ها را بررسی کند.
A tetrazolium salt has been used to develop a quantitative colorimetric assay for mammalian cell survival and proliferation. The assay detects living, but not dead cells and the signal generated is dependent on the degree of activation of the cells. This method can therefore be used to measure cytotoxicity, proliferation or activation. The results can be read on a multiwell scanning spectrophotometer (ELISA reader) and show a high degree of precision. No washing steps are used in the assay. The main adavantages of the colorimetric assay are its rapidly and precision, and the lack of any radioisotope. We have used the assay to measure proliferative lymphokines, mitogen stimulations and complement-mediated lysis.
Introduction
Many biological assays require the measurement of surviving and/or proliferating mammalian cells. This can be achieved by several methods, e.g., counting cells that include/exclude a dye, measuring released 5aCr-labeled protein after cell lysis, and measuring incorporation of radioactive nucleotides ([3H]thymidine or [lZSI]iododeoxyuridine) during cell proliferation. The radioactive method can be partially automated and can handle moderately large numbers of samples, but even with these methods, it is difficult to process thousands of assay points per day. In our current research we assay many samples of various lymphokines that induce cell proliferation, and so we required a rapid and quantitative assay capable of handling large numbers of samples.
مقدمه
مواد و روش ها
رده های سلولی
تست رنگ سنجی MTT (تترازولیوم)
تست اینترلوکین 2
تکثیر سلول های طحال توسط میتوژن
پردازش کامپیوتری
نتایج
بحث
منابع
Introduction
Materials and Methods
Cell lines
Colorimetric MTT (tetrazolium) assay
Interleukin 2 assay
Mitogen-induced proliferation of spleen cells
Computer processing
Results
Discussion
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت ورد (word) با قابلیت ویرایش، بدون آرم سایت ای ترجمه
- ترجمه فارسی مقاله با فرمت pdf، بدون آرم سایت ای ترجمه